ATCC菌株保存方法有多種,更理想的為真空冷凍干燥法,具有保存時(shí)間長、成活率高、變異小等優(yōu)點(diǎn),但操作技術(shù)難度大,花費(fèi)高,需特殊設(shè)備,一般單位不易做到,而一些常規(guī)方法,常因傳代次數(shù)多、易污染、易變異,給保存帶來諸多不利。多年來,微生物學(xué)工作者們一直在研究摸索簡便而行之有效的ATCC菌株保存方法,筆者查閱相關(guān)資料并吸取同行工作者們的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),總結(jié)了幾種方法簡便、效果好的保存方法,現(xiàn)介紹如下。
先將液體石蠟滅菌,然后放于37℃恒溫箱中,使水汽蒸發(fā)掉備用。再將需要保存的ATCC菌株在更適宜的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng),用無菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟,注入已長好的斜面培養(yǎng)基上,用量以高出斜面頂端1cm 為準(zhǔn)。試管需直立,置4℃或室溫下保存,一般無芽胞細(xì)菌可保存1年左右。
甘油一生理鹽水保存液的制備:取甘油(分析純)8份加入生理鹽水2份,充分混合后,經(jīng)121.3℃ 30分鐘滅菌備用。將此培養(yǎng)液與保存液以5:2的比例混合分裝于滅菌的微量離心管,置-20℃冰箱保存(鏈球菌、奈瑟氏菌置-80℃冰箱保存)。使用時(shí)需37℃水浴中快速解凍。用上述方法保存一般菌株可存活3年以上,鏈球菌、奈瑟菌可存活12-15個(gè)月,且性狀未發(fā)生變異。此方法采用幼齡肉湯培養(yǎng)物效果好,且適用于鏈球菌、奈瑟氏菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的ATCC菌株。