在培育ATCC菌株的過程中,我們通常需要通過各種操作使這種菌種的生長狀態(tài)更好,一般需要分離,那么為什么要分離呢?主要是把它變成單一的純菌株,這樣才能更好的單獨培養(yǎng)。分離ATCC菌株的具體方法有哪些?小編在文章中給大家做了具體的介紹,快來看看文章吧!
為何要分離ATCC菌株?
1.將某一真菌與自然界其他真菌分離,成為單一的純菌株,即ATCC菌株分離。要栽培食用菌,先要得到要栽培的菌。分離應(yīng)在非常干凈的無菌環(huán)境中進行。無菌操作室或無菌操作箱是不可缺少的設(shè)備。
2.無菌手術(shù)室或無菌手術(shù)箱在工作前應(yīng)提前進行滅菌消毒。通常,應(yīng)在室內(nèi)噴灑水霧,以消除懸浮在空氣中的灰塵和微生物,然后制備2%的煤酚皂液,或1:40噴灑福爾馬林溶液進行消毒,或用高錳酸鉀和乳酸產(chǎn)生蒸汽消毒。
除工作環(huán)境外,工作人員應(yīng)保持自身清潔,工作前應(yīng)用肥皂水洗手,有條件時應(yīng)穿上滅菌工作服,并帶日罩。分離材料的處理:由于食用菌有特殊的子實體,可以利用其子實體直接分離cmcc菌種,分離前應(yīng)對材料進行無菌處理。
具體的ATCC菌株分離方法:
1.組織分離法。
選用子實體肥大、無病蟲害、經(jīng)濟性好、產(chǎn)量高、質(zhì)量好的個體作為分離材料,用刀在子實體上取一小塊菌肉,移放在斜面培養(yǎng)基中心,在25-27℃的恒溫箱中培養(yǎng)2-3天,組織塊上長出白色菌絲,移植到斜面進行純化培養(yǎng)。菌絲長滿培養(yǎng)基后,移植純化到新的培養(yǎng)基中,培育成母種。
2.孢子分離法。
將選定的子實體用無菌水沖洗幾次,用無菌紗布吸去表面水分,用消毒后的鋼絲鉤掛在接種箱上,懸掛或懸掛在錐形瓶或鐘罩中,送入恒溫箱保持20-26℃的溫度,培養(yǎng)1~2天后,看到培養(yǎng)基上有微暗的灰粉,便將子實體移出,使孢子在培養(yǎng)基上發(fā)育成菌絲,再移至試管培養(yǎng)基上,即得到母種。
3.基質(zhì)分離法。
又稱寄主分離,是從食用菌著生的原基上取一塊木頭,從一塊木頭中分離提取菌絲,純化培養(yǎng)后獲得ATCC菌株。將0.2%的升錄液浸泡,用無菌水沖洗,擦干,用刀刮去表層,放入三角瓶中,經(jīng)過5天的培養(yǎng),可以看到小木塊周圍的白色菌絲,待擴散后,再經(jīng)過純化轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。