復(fù)蘇冰凍的ATCC菌株
1.先準(zhǔn)備好細(xì)菌培養(yǎng)的無菌試管，及產(chǎn)品說明書推薦的相應(yīng)細(xì)菌培養(yǎng)基。在試管中裝入適量配好的培養(yǎng)基，并置于培育箱以平衡溫度和pH值。
2.將凍存管置于水浴中并輕微的攪拌以幫助解凍。水浴溫度設(shè)定與該細(xì)菌的培養(yǎng)溫度一致。解凍過程應(yīng)該盡快，大約2分鐘或待最后一塊小冰晶體剛?cè)诨?，就?yīng)將細(xì)菌凍存管取出水浴。
3.在從水浴中取出的凍存管表面噴灑70%乙醇配制的消毒劑，用無菌紙巾或紗布試干。之后的操作步驟都應(yīng)該遵循在無菌條件下嚴(yán)格操作。
4.小心擰開凍存管的頂部，將管內(nèi)容物用移液槍轉(zhuǎn)移到含適量培養(yǎng)基的無菌培養(yǎng)試管。可制備額外的培養(yǎng)試管。從第一個培養(yǎng)接種管中取0.5毫升混勻的培養(yǎng)物，轉(zhuǎn)移到其他備好的培養(yǎng)試管。
5.在產(chǎn)品說明書推薦的適當(dāng)溫度和條件下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。
6.在產(chǎn)品說明書推薦的培養(yǎng)時間下觀察細(xì)菌的生長狀況。不同細(xì)菌菌株的具體培養(yǎng)時間會有不同，請依照產(chǎn)品說明書列出的細(xì)菌培養(yǎng)條件和時間。
復(fù)蘇凍干的細(xì)菌
1.使用吸管或移液槍,在無菌凍干物中加入0.5毫升備好的產(chǎn)品說明書所推薦的生長培養(yǎng)基。混勻。
2.將全部混合物轉(zhuǎn)移到裝有5到6毫升培養(yǎng)基的無菌培養(yǎng)試管中。此外，滴入幾混合物到瓊脂培養(yǎng)皿斜面作培養(yǎng)。
3.可制備額外的培養(yǎng)試管。從第一個培養(yǎng)接種管中取0.5毫升混勻的培養(yǎng)物，轉(zhuǎn)移到其他備好的培養(yǎng)試管。在產(chǎn)品說明書推薦的適當(dāng)溫度和空氣條件進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。
4.在產(chǎn)品說明推薦書的培養(yǎng)時間下觀察細(xì)菌的生長狀況。不同細(xì)菌菌株的具體培養(yǎng)時間會有不同，請依照產(chǎn)品說明書列出的細(xì)菌培養(yǎng)條件和時間。大部分細(xì)菌在幾天內(nèi)會從凍干狀態(tài)復(fù)蘇生長。(請參閱:*注1)
*注1:從冷凍或凍干狀態(tài)恢復(fù)，某些細(xì)菌菌株可能會出現(xiàn)較長時間的遲滯期。這些菌株可能需要延長培養(yǎng)時間。
*注2: ATCC的凍干粉有安瓿瓶和西林瓶多種包裝。想知道如何打開安瓿瓶，請戳 論安瓿瓶的正確打開方式
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